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《生物工程实验指导》共三章内容，*章为生物工程基础实验，包括实验室常用生物化学实验技术(如分光光度法、色谱法、电泳、离心、透析等)，以及基础生物化学和分子生物学的一些基础性实验；第二章为验证性实验，是在*章的基础上，安排了一些大分子物质的提取分离及其测定等验证性实验；第三章为综合性实验，以前两章的实验操作为基础，在实验设计上，每个综合实验都以产品生产为主线，综合利用多种实验技术，力争使学生得到多方面的综合训练。内容上，涵盖发酵工程、酶工程、生物分离工程及生物信息学等；应用上，包括医药、能源、食品等，特别是生物多糖、果胶、蛋白酶的利用等目前生物工程领域的研究热点，这些实验的安排既结合了科研热点也贴近生活，提高了学生的生物工程实验操作技能。书末配有附录，介绍了生物化学实验基本常识与基本操作等。

《生物工程实验指导》实用性和可操作性较强，适合生物工程、生物技术、医药、食品、生物化工等专业师生使用，还可供应用技术开发领域、食品加工、医药工业、生物化工等领域科研工作者、生产技术人员参考。

章生物工程基础实验1

实验1牛肉膏蛋白胨培养基的制备及高压蒸汽灭菌1

实验2微生物细胞的显微直接计数法5

实验3质粒DNA分子转化7

实验4碱裂解法小量提取质粒DNA9

实验5特异性DNA片段的PCR扩增13

实验6小鼠脾细胞的体外分离培养15

实验7动物细胞生长曲线的测定17

实验8动物细胞的冻存和复苏19

实验9酶联免疫吸附测定20

实验10凝胶过滤色谱法检测蛋白质分子量22

实验11离子交换树脂总交换容量的测定26

实验12蛋白质含量的测定28

实验13蛋白质的两性性质及等电点的测定32

实验14氨基酸的分离鉴定——纸色谱法34

实验15植物体内的转氨基作用36

实验16血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳39

第二章验证性实验41

实验17牛乳中酪蛋白的提取41

实验18双水相体系中蛋白质分配系数的测定43

实验19大蒜细胞SOD酶的提取与分离45

实验20淀粉酶活性的测定48

实验21影响酶活力的因素——正交试验法51

实验22细胞色素c的制备和含量测定54

实验23植物组织中DNA的提取57

实验24实验室环境和人体表面微生物的检查59

实验25细菌的简单染色法及革兰氏染色法63

实验26细菌的芽孢染色法及活细菌运动性观察66

实验27水中细菌总数的测定68

实验28骨髓间充质干细胞体外培养和浓度计算70

实验29SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量72

实验30抗生素生物效价测定75

第三章综合性实验79

节海藻多糖的分离和性质研究79

实验31海藻粗多糖样品的制备80

实验32海藻粗多糖中总糖含量的测定81

实验33海藻粗多糖中还原糖含量的测定84

实验34海藻粗多糖中蛋白质含量的测定85

实验35海藻粗多糖中糖醛酸含量的测定87

实验36海藻粗多糖中单糖组成分析88

实验37海藻粗多糖的紫外光谱和红外光谱分析90

实验38海藻粗多糖的灰分分析92

第二节柑橘果胶的分离和性质研究94

实验39皮渣的预处理95

实验40微波辅助提取橘皮果胶96

实验41超声辅助提取橘皮果胶97

实验42柑橘果胶中半乳糖醛酸含量的测定99

实验43柑橘果胶中酯化度的测定101

第三节微生物发酵生产蛋白酶102

实验44腐乳中产蛋白酶微生物的初筛及分离纯化103

实验45产蛋白酶微生物的摇瓶复筛105

实验46产蛋白酶微生物的鉴定107

实验47小型发酵罐发酵生产蛋白酶108

第四节生姜蛋白酶的提取纯化111

实验48生姜蛋白酶的提取及沉淀分离111

实验49生姜蛋白酶的双水相萃取分离114

实验50生姜蛋白酶的反胶束萃取分离117

第五节大米生料酿酒工艺118

实验51大米生料酿酒工艺及其控制119

实验52成品检测121

附录124

附录1实验须知124

附录2生物试剂常识125

附录3常用缓冲溶液的配制125

附录4旋光光度法128

附录5相对密度的测定方法（2015版《中华人民共和国药典》）129

附录6熔点测定法（2015版《中华人民共和国药典》）130

附录7黏度测定法132

附录8常用的微生物培养基及配制方法137

附录9实验室小型发酵罐灭菌及使用操作技术介绍142

参考文献146

李霞，桂林理工大学化学与生物工程学院 生物工程教研室，教研室主任，副教授，主要从事天然产物提取和功能性研究。在糖类化合物的结构与活性研究工作方面具有丰富的经验。主持重点实验室课题3项（在研），广西区自然科学基金一项（已结题），主持横向课题两项（已结题），主持区级教改课题一项（已结题），主持国家自然科学基金青年基金一项（已结题），浙江省自然科学基金一项（已结题），浙江省卫生厅科技计划一项（已结题）。参与国家自然科学基金、浙江省卫生厅科技计划和杭州市科技计划多项。发表论文三十余篇，授权专利2项。

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编辑推荐

1.由长期从事生物工程专业实验教学的教师集体编写而成，是编者的集体智慧。

2.内容包括生物工程基础实验、验证性实验、综合性实验（共52个实验），这些实验的安排既结合了科研热点也贴近生活，培养学生的生物工程实验操作技能；并于附录介绍了生物化学实验基本常识与基本操作。实用而全面。

3.适合生物工程、生物技术、医药、食品、生物化工等专业师生使用，还可供应用技术开发领域、食品加工、医药工业、生物化工等领域的生命科学相关的教学工作者、科研工作者、研究生以及生产一线工作者参考。

前言

近些年来，以基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程为代表的现代生物技术发展迅猛，并日益影响和改变着人们的生产和生活方式。生物工程是生物技术的统称，是指运用生物化学、分子生物学、微生物学、遗传学等原理与生化工程相结合，来改造或重新创造、设计细胞的遗传物质、培育出新品种，以工业规模利用现有生物体系，以生物化学过程来制造工业产品。简言之，就是将活的生物体、生命体系或生命过程产业化的过程。它是20世纪70年代初兴起的一门新兴综合性应用学科，随着生命科学在20世纪有了惊人的发展，生物工程技术也上升到一个新的高度。人类基因组计划的启动和进展，更显示出生物工程实验技术是生命科学研究领域和生物工程应用领域中一项非常重要的基本技术。因此，各高校相继开设了生物工程专业，生物工程实验是培养生物工程专业学生掌握专业实验技能的重要实践教学环节。

为提高实验教学环节的效率与质量，我们在已使用多年的实验讲义基础上，结合多年教学实践经验，参考国内外的生物工程相关实验教材，编写了这本《生物工程实验指导》。本教材在内容上做了精心选择，共安排了三章内容，章为生物工程基础实验，包括实验室常用生物化学实验技术(如分光光度法、色谱法、电泳、离心、透析等)，以及基础生物化学和分子生物学的一些基础性实验；第二章为验证性实验，是在章的基础上，安排了一些大分子物质的提取分离及其测定等验证性实验；第三章为综合性实验，以前两章的实验操作为基础，在实验设计上，每个综合实验都以产品生产为主线，综合利用多种实验技术，力争使学生得到多方面的综合训练。内容上，涵盖发酵工程、酶工程、生物分离工程及生物信息学等；应用上，包括医药、能源、食品等，特别是生物多糖、果胶、蛋白酶的利用等目前生物工程领域的研究热点，这些实验的安排既结合了科研热点也贴近生活，提高了学生的生物工程实验操作技能。书末配有附录，介绍了生物化学实验基本常识与基本操作等。

本教材实用性和可操作性较强，适合生物工程、生物技术、医药、食品、生物化工等专业师生使用，还可供应用技术开发领域、食品加工、医药工业、生物化工等领域的科研工作者、生产技术人员参考。

本教材由长期从事生物工程专业实验教学的一线教师集体编写而成，是集体智慧的结晶，参加编写工作的主要有：李霞（实验1～实验5、实验31～实验38）、李静（实验6～实验10）、李海云（实验11、实验29、实验30、实验44～实验52）、刘红艳（实验12～实验21）、陈慧英（实验22、实验23、实验29、实验30）、张会香（实验24～实验28）、李培骏（实验39～实验43）、李子院（附录）。

由于编者水平有限，书中难免存在不足和疏漏之处，恳请读者批评指正，以便再版时进一步完善。

编者

2018年4月于桂林